无细胞蛋白合成试剂盒(Cell-Free Protein Synthesis Kit)是一种在体外高效表达目标蛋白的先进生物技术工具,无需依赖活细胞即可完成从基因模板到功能性蛋白质的全过程。其核心原理是利用高度纯化的细胞提取物(如大肠杆菌S30裂解液)或重组元件系统(如PURE系统),提供核糖体、tRNA、翻译因子、能量再生体系及氨基酸等必需组分,在试管中重建完整的转录-翻译“工厂”。
1、快速高效合成(1–5小时出结果)
无需细胞培养、转化、诱导,1–5小时完成从模板到蛋白的全流程,远快于细胞表达的3–7天。
兼容模板广:质粒DNA、线性PCR产物、mRNA均可直接使用,无需克隆构建载体。
2、突破表达瓶颈(难表达/毒性蛋白s选)
可高效合成细胞内难表达蛋白:膜蛋白、GPCR、抗体片段、多二硫键蛋白、毒性蛋白(如细菌毒素、凋亡蛋白)。
避免包涵体:体外环境可控,减少蛋白聚集,提高可溶性与天然折叠效率。
3、高活性与精准修饰(功能研究级品质)
保留天然构象:真核源试剂盒(麦胚/兔网织红细胞)支持糖基化、磷酸化、二硫键形成等翻译后修饰,蛋白活性接近体内。
可控标记:可直接掺入荧光/生物素/放射性标记氨基酸,实现共翻译标记,简化后续检测。
4、高通量与自动化适配(药物筛选/文库构建)
微量反应(10–50μL),单批次可并行数十至数百个样品,适配96/384孔板自动化平台。
支持突变体库、抗体库、酶变体库快速构建与功能筛选,加速定向进化与药物研发。
5、体系灵活可控(机制研究利器)
组分明确:可精准调控反应条件(pH、温度、离子强度、伴侣蛋白),便于研究蛋白折叠、翻译调控、分子间相互作用。
低背景干扰:无细胞内核酸酶/蛋白酶污染,目标蛋白纯度高,可直接用于功能实验或纯化。
